啮齿类肝炎病毒感染大鼠模型的建立

目的 建立啮齿类肝炎病毒(rodent hepacivirus,RHV)感染大鼠模型.方法 将体外转录获得的RHV rn1亚型(RHV-rn1)基因组全长RNA经大鼠肝内和尾静脉两种注射途径给药,于不同时间点经尾静脉采血,分离血清,RT-qPCR法检测RHV-rn1基因组拷贝数.将肝脏注射感染病毒大鼠的血清(P0代RHV-rn1)经尾静脉注射进行大鼠个体传代,共传3代,获得P1、P2、P3代RHV-rn1.RT-qPCR法检测接种P0代RHV-rn1后不同时间点大鼠血清、RHV-rn1在体内传至P3代时大鼠不同脏器/组织及各代病毒血清的RHV-rn1基因组拷贝数.用不同剂量(101、102、103、104、105 copies/μL)的P3代RHV-rn1经尾静脉感染大鼠,检测血清中的RHV-rn1基因组拷贝数.结果 肝内注射组大鼠于注射后2 d出现高滴度病毒血症,至注射后14 d RHV-rn1基因组拷贝数开始稳定,约106 copies/μL,可持续至49 d;尾静脉注射组大鼠至28 d未检测到病毒血症.接种P0代RHV-rn1 3 d后,大鼠血清中RHV-rn1基因组拷贝数为105 copies/μL,随后逐渐上升,至14 d时,维持约在106 copies/μL.RHV-rn1在体内传至P3代时,大鼠肝脏中的RHV-rn1基因组拷贝数达107 copies/mg,高于其他组织器官1 000倍以上.P1、P2、P3代RHV-rn1的拷贝数分别为1.12×107、7.5×106、1.65×107 copies/μL.RHV-rn1半数感染的拷贝数为1025 copies.结论 体外转录获得的RHV RNA经肝脏注射可使大鼠出现高滴度病毒血症,形成慢性感染,获得的RHV-rn1具有嗜肝性,且感染性较强,本实验成功建立了 RHV感染的大鼠动物模型.