抗副溶血弧菌海洋真菌HL-3菌株的鉴定及其活性物质的分离

[背景]目前水产养殖中副溶血弧菌等水产致病菌的预防和治疗主要使用的是抗生素,短期内能够起到较好的效果,但是长期使用抗生素不仅使得病原菌的耐药性增加,而且会产生一系列问题.因此,寻找安全有效的抗生素替代品迫在眉睫.[目的]筛选具有抗副溶血弧菌活性的海洋微生物,鉴定其种类并优化其培养条件,并对其活性物质进行初步分离.[方法]利用稀释涂布平板法和平板划线法分离纯化海洋微生物,通过牛津杯法筛选具有抗副溶血弧菌活性的菌株.根据菌株的形态特征和ITS序列分析对活性菌株进行鉴定.通过筛选培养基种类和盐度确定其培养条件.通过半制备高效液相色谱制备化合物,并利用核磁共振波谱数据鉴定化合物的结构.[结果]从海螺、小黄鱼、对虾等11种样品中分离出海洋微生物菌株76株,其中真菌26株.筛选得到一株具有抗副溶血弧菌活性的真菌菌株HL-3,鉴定为黄曲霉.黄曲霉HL-3菌株在改良沙氏培养基条件下,产物化学多样性和抗菌活性较好.黄曲霉HL-3菌株在真菌5号培养基中产物单一且抗菌活性较好,纯化出来的化合物结构被鉴定为曲酸.曲酸对副溶血弧菌的最小抑菌浓度为4.0 mg/mL.[结论]实验结果为进一步利用各种色谱手段分离纯化HL-3菌株产生的抗副溶血弧菌活性次生代谢产物提供了 一定的理论依据.