姜黄素通过上调miR-124减轻脂多糖诱导的大鼠急性肺损伤

目的 探究姜黄素(Cur)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用及可能机制.方法 体外培养大鼠肺泡巨噬细胞NR8383,采用双荧光素酶报告基因实验验证微小RNA-124(miR-124)与肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的靶向关系.SD大鼠采用随机数字表法分为对照组(NC组)、LPS组、LPS+Cur组、LPS+Cur+inhibitor-NC组、LPS+Cur+inhibitor组,每组10只.LPS组腹腔注射LPS 10 mg/kg制备ALI大鼠模型,LPS+Cur组在ALI模型制备30 min后尾静脉注射Cur 200 mg/kg,LPS+Cur+inhibitor-NC组、LPS+Cur+inhibitor组大鼠尾静脉分别注射miR-124 inhibitor-NC、miR-124 inhibitor 50 mg/kg 1周后腹腔注射LPS 10 mg/kg,30 min后尾静脉注射Cur 200 mg/kg,NC组注射等量生理盐水30 min后尾静脉注射等量生理盐水.干预24 h后,HE染色观察肺组织病理变化,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,分别采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(WB)检测肺组织miR-124、TRAF6 mRNA及蛋白表达.结果 双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-124可直接靶向TRAF63'UTR区负调控其表达.动物实验结果表明,NC组大鼠肺组织结构清晰,肺泡结构完整,无明显异常改变;LPS组、LPS+Cur+inhibitor组大鼠肺组织结构破坏严重,肺间质增厚,大量炎性细胞浸润,弥漫性充血、渗出,肺泡萎缩;LPS+Cur组、LPS+Cur+inhibitor-NC组大鼠肺组织损伤减轻.与NC组比较,LPS组大鼠血清TNF-α、IL-6、肺组织TRAF6 mRNA及蛋白表达水平显著增加,miR-124表达水平显著降低(P<0.05);与LPS组比较,LPS+Cur组大鼠血清TNF-α、IL-6、、肺组织TRAF6 mRNA及蛋白表达水平显著降低,miR-124表达水平显著增加(P<0.05);与LPS+Cur+inhibitor-NC组比较,LPS+Cur+inhibitor组大鼠血清TNF-α、IL-6、肺组织TRAF6 mRNA及蛋白表达水平显著增加,miR-124表达水平显著降低(P<0.05).结论 Cur可通过上调miR-124靶向抑制TRAF6减轻LPS诱导的大鼠ALI及炎症反应,发挥治疗作用.