丹蒌片降低db/db小鼠肝脏脂肪生成及炎症反应改善胰岛素抵抗的作用研究

该文旨在研究丹蒌片(Danlou Tablets,DLT)对2型糖尿病db/db小鼠胰岛素抵抗的作用及潜在机制.将db/db雄性小鼠随机分成模型对照组、二甲双胍组(盐酸二甲双胍片100mg·kg-1)和丹蒌片组(丹蒌片1 g·kg-1),另取C57BL/6J小鼠作为正常对照组.二甲双胍组和丹蒌片组小鼠灌胃给予相应剂量药物,每日1次,连续给药16周.通过检测小鼠空腹血糖(FBG)、葡萄糖耐量及胰岛素耐量评价丹蒌片对糖尿病小鼠血糖及胰岛素抵抗的影响;通过检测血清游离脂肪酸(NEFA)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,评价丹蒌片对糖尿病小鼠血脂的影响;通过检测小鼠肝脏指数及肾周脂肪指数评价丹蒌片对非脂肪组织与脂肪组织中脂质蓄积的影响;基于IRS-1/PI3K/Akt胰岛素信号通路,采用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测小鼠肝脏组织中胰岛素受体β(IRβ)、磷酸化胰岛素受体β(p-IRβ)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)蛋白表达水平,探讨丹蒌片改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用机制;基于SREBP-1/FAS信号通路,检测固醇调控元件结合蛋白-1(SREBP-1)蛋白表达水平以及固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、二酰甘油酰基转移酶-1(Dgat1)、二酰甘油酰基转移酶-2(Dgat2)基因表达水平,探讨丹蒌片对糖尿病小鼠脂质代谢的影响;通过实时定量PCR(RT-PCR)法检测小鼠肝脏中与炎症相关的半乳糖凝集素-3(Gal-3)、白细胞介素-6(IL-6)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)基因表达水平,评价丹蒌片对糖尿病小鼠炎症反应的影响.结果表明,丹蒌片可显著降低糖尿病小鼠血糖、血脂水平,具有改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用.与模型对照组相比,丹蒌片可显著提高糖尿病小鼠肝脏p-IRβ、PI3K和IRS-1蛋白表达水平(P＜0.05或P＜0.01),并降低肝脏SREBP-1蛋白表达水平(P＜0.05);丹蒌片还能下调糖尿病小鼠肝脏中与脂质代谢相关的SREBP-1c、FAS、ACC、Dgat1、Dgat2基因表达水平(P＜0.01),下调糖尿病小鼠肝脏中与炎症相关的Gal-3、IL-6、MCP-1基因表达水平(P＜0.05或P＜0.01).这些结果表明,丹蒌片改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗的作用机制可能与调控IRS-1/PI3K/Akt胰岛素信号通路和SREBP-1/FAS信号通路,降低脂质生成,抑制炎症反应有关.