HK-2外泌体提取及体外细胞靶向性的研究

目的 比较HK-2外泌体分离方法对粒径分布的影响,探索体外细胞摄取外泌体模式对外泌体细胞靶向性的参考价值.方法 采用超速离心法和3种试剂盒分离HK-2外泌体,测定其粒径分布;用PKH67标记HK-2外泌体,体外观察HFL1、hFOB1.19、Kupffer、HCT1164种细胞吸收HK-2外泌体,以及HCT116吸收HCT116、HK-2、HFL1、Kupffer 4种细胞的外泌体情况.结果 不同的分离方法得到外泌体的粒径分析结果显示,超速离心法得到外膜囊泡的粒径比较均一,集中在100 nm左右.体外细胞吸收外泌体试验结果显示:(1)在体外,HK-2外泌体均能被HFL1、hFOB1.19、Kupffer、HCT116细胞吸收;(2)HCT116能吸收HCT116、HK-2、HFL1、Kupffer细胞的外泌体.结论 超速离心法和试剂盒都能分离得到HK-2外泌体,超速离心法得到外泌体粒径大小分布较均一;试剂盒操作比较便捷,但是大囊泡和杂蛋白居多.在体外,同种外泌体能被多种细胞摄取吸收,同种细胞能吸收不同种细胞外泌体,表明外泌体在体外没有特别好的靶向性.