H5N1型流感病毒神经氨酸酶在小鼠模型中的免疫保护性评价

目的 探讨在小鼠模型中H5N1型流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的免疫原性,并进行攻毒试验评价其免疫保护作用.方法 制备H5N1型流感病毒裂解疫苗原液,磁珠法纯化获取NA蛋白.将BALB/c小鼠分为 2 μg NA、10 μg NA、50 μg NA、2 μg NA+MF59、10 μg NA+MF59、50 μg NA+MF59 和 MF59 组,共 7 组,每组10只,肌内注射免疫.初次免疫2周后,相同程序/剂量进行加强免疫,第4周采血分离血清,ELISA法测定效价;第5周进行攻毒试验,监测攻毒后2周内小鼠体重和体温变化,同时观察临床症状.结果 磁珠法纯化的H5N1 NA纯度达90％,浓度为201.23 μg/mL.2次免疫后,各剂量组血清效价呈剂量依赖性,加MF59佐剂组血清抗体效价均高于未加MF59佐剂组,其中50 μg NA+MF59组效价最高(平均效价为121 600).攻毒试验发现,50 μg NA+MF59能够保护100％(8只)的小鼠免受H5N1攻击,攻毒后50 μg NA+MF59组临床评分低于MF59组,但两组小鼠体温变化差异无统计学意义(P＞0.05).结论 免疫H5N1 NA能够诱导BLAB/c小鼠产生NA特异性抗体,使用MF59佐剂能够显著提高抗体效价,保护小鼠免受半数致死剂量的H5N1攻击,并能明显减轻临床症状.