桑白皮黄酮提取物通过调控miR-223-3p表达对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响

Chinese Journal of Gerontology(2022)

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摘要
目的 探讨桑白皮黄酮提取物对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及作用机制.方法 体外培养小鼠足细胞,分为对照组、高糖组、高糖+桑白皮黄酮提取物组、高糖+miR-223-3p组、高糖+miR-NC组、高糖+桑白皮黄酮提取物+anti-miR-223-3p组和高糖+桑白皮黄酮提取物+anti-miR-NC组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)荧光定量法检测细胞内活性氧(ROS)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,Western印迹检测各组细胞中活化的半胱天冬酶(cleaved caspase)-3、足细胞损伤标志物去氧肾上腺素(Nephrin)、结蛋白(Desmin)和波形蛋白(Vimentin)的表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞中miR-223-3p表达水平.结果 与对照组比较,高糖组足细胞存活率、细胞中ROS和MDA水平及cleaved caspase-3、Desmin和Vimentin蛋白水平显著升高(P<0.05),SOD活力、Nephrin蛋白和miR-223-3p水平显著降低(P<0.05).与高糖组比较,桑白皮黄酮提取物组足细胞存活率、细胞中ROS和MDA水平及cleaved caspase-3、Desmin和Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD活力、Nephrin蛋白和miR-223-3p水平显著升高(P<0.05).与miR-NC组比较,miR-223-3p组足细胞存活率、细胞中ROS和MDA水平及cleaved caspase-3、Desmin和Vimentin蛋白水平显著降低(P<0.05),SOD活力和Nephrin蛋白水平显著升高(P<0.05).与高糖+桑白皮黄酮提取物+anti-miR-NC组比较,高糖+桑白皮黄酮提取物+anti-miR-223-3p组足细胞存活率、细胞中ROS和MDA水平及cleaved caspase-3、Desmin和Vimentin蛋白水平显著升高(P<0.05),SOD活力和Nephrin蛋白水平显著降低(P<0.05).结论 桑白皮黄酮提取物可降低高糖引起的小鼠足细胞损伤,其作用机制可能与上调miR-223-3p表达有关.
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