miR-204靶向GPRC5A对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响

Chinese Journal of Gerontology(2022)

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摘要
目的 探讨微小RNA-204(miR-204)对结肠癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响.方法 体外培养人正常结肠上皮细胞(FHC)和人结肠癌肿瘤细胞(HCT116);将HCT116细胞随机分为对照组、miR-204 mimic组和miR-204 NC组;利用实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组HCT116细胞miR-204及G蛋白耦联受体C型家族(GPRC)5A表达情况;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测各组HCT116细胞的增殖情况;划痕实验检测各组HCT116细胞的迁移能力;Transwell法检测各组HCT116细胞的侵袭能力;Western检测各组HCT116细胞GPRC5A蛋白的表达情况;采用双荧光素酶报告实验验证miR-204与GPRC5A的靶向关系.结果 与正常组相比,各组HCT116细胞miR-204表达水平显著降低(P<0.05).与对照组和miR-204 NC组相比,miR-204 mimic组HCT116细胞miR-204表达水平显著升高(P<0.05),细胞存活率、划痕愈合率、侵袭数量、GPRC5A mRNA及GPRC5A蛋白表达水平显著降低(P<0.05).与GPRC5A-3'UTR-WT+miR-204 NC组比较,GPRC5A-3'UTR-WT+miR-204 mimic组荧光素酶活性降低(P<0.05).结论 过表达miR-204可能靶向下调GPRC5A基因表达,抑制人结肠癌细胞的增殖、迁移及侵袭行为.
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