结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶的结晶方法

Journal of Guangdong Pharmaceutical University(2022)

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摘要
目的 制备结核分枝杆菌甲硫氨酰tRNA合成酶(MtMetRS)晶体.方法 设计不同的重组MtMetRS蛋白,使用大肠杆菌表达重组蛋白.坐滴气相扩散法在293 K温度下筛选不同重组蛋白的结晶条件,并使用悬滴法进行晶体优化.优化的晶体经液氮速冻保存.在上海同步辐射光源进行晶体衍射数据采集.结果 使用不同设计的重组蛋白进行结晶筛选和优化,最终获得了可以进行晶体衍射的高分辨率蛋白质晶体.并确定6×His序列在MtMetRS分子的结晶中起到关键作用.结论 MtMetRS分子两端的6×His序列是帮助MtMetRS分子结晶的重要因素.
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