微小RNA-144对胆管细胞癌细胞增殖和侵袭能力的影响

目的 检测微小RNA-144(miR-144)在胆管细胞癌(CCA)细胞中的表达,探讨miR-144对CCA细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制.方法 慢病毒载体和空病毒载体构建成功后感染HCCC-9810和CCLP1细胞,将其分为miR-144 HCCC-9810组、miR-144 CCLP1组、空病毒载体Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组.采用茎环引物法检测稳转株细胞中miRNA的表达水平,CCK-8法检测miR-144对细胞增殖的影响,划痕实验计算细胞迁移面积,Transwell侵袭实验检测miR-144对CCA细胞侵袭能力,Western Blot检测MMP-2、p-AKT、AKT蛋白的表达水平,并分组进行比较.结果 miR-144 HCCC-9810组和miR-144 CCLP1组miR-144的表达水平分别高于Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组;miR-144 HCCC-9810组及miR-144 CCLP1组培养48 h及72 h后细胞相对数均低于同期Vector HCCC-9810组及Vector CCLP1组;36 h后miR-144 HCCC-9810组和miR-144 CCLP1组细胞的迁移面积分别较Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组减少;miR-144 HCCC-9810组和miR-144 CCLP1组细胞比例明显低于Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组(P<0.05).miR-144 HCCC-9810组和miR-144 CCLP1组细胞中MMP-2和p-AKT的表达水平明显低于Vector HCCC-9810组和Vector CCLP1组(P<0.05).结论 miR-144通过调控细胞增殖、迁移及侵袭特性影响CCA发生发展,miR-144对CCA细胞增殖、迁移能力的影响可能是通过下调p-AKT和MMP-2表达来实现的.