乏氧条件下组蛋白去乙酰化酶6对肝癌细胞增殖转移能力的影响

目的 探讨乏氧条件下组蛋白去乙酰化酶6(HDAC6)对肝癌细胞增殖转移能力的影响.方法 取46例肝癌患者的肝癌组织及相应的癌旁组织,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HDAC6 mRNA的相对表达量、免疫组化法检测HDAC6蛋白的表达情况.将转染HDAC6小干扰RNA(siRNA)的乏氧人肝癌HepG2细胞作为Hp-siHDAC6组,未转染的乏氧人肝癌HepG2细胞作为Hp组,将常氧人肝癌HepG2细胞作为NC组.采用定量RT-PCR法检测3组人肝癌HepG2细胞HDAC6 mRNA的相对表达量,采用CCK8法检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力.结果 肝癌患者肝癌组织中HDAC6 mRNA的相对表达量明显低于癌旁组织(P﹤0.01),HDAC6蛋白阳性表达率为34.78％,明显低于癌旁组织的73.91％(P﹤0.01).肿瘤直径≥5 cm、术前甲胎蛋白(AFP)水平≥400 ng/ml、分化程度为低分化、TNM分期为Ⅲ+Ⅳ期的肝癌患者肝癌组织中HDAC6阳性表达率分别低于肿瘤直径﹤5 cm、术前AFP水平﹤400 ng/ml、分化程度为中高分化、TNM分期为Ⅰ+Ⅱ期的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05).Hp组和Hp-siHDAC6组细胞中HDAC6 mRNA的相对表达量均明显低于NC组(P﹤0.01),Hp-siHDAC6组细胞中HDAC6 mRNA的相对表达量明显低于Hp组(P﹤0.01).转染48、72、96 h后,Hp组和Hp-siHDAC6组细胞的光密度(OD)值均明显高于NC组(P﹤0.01),Hp-siHDAC6组细胞OD值均明显高于Hp组(P﹤0.01).Hp组和Hp-siHDAC6组细胞迁移数、细胞侵袭数均明显高于NC组(P﹤0.01),Hp-siHDAC6组细胞迁移数、细胞侵袭数均明显高于Hp组(P﹤0.01).结论 HDAC6蛋白在肝癌组织中表达下调,与肝癌患者的肿瘤直径、术前AFP水平、分化程度、TNM分期密切相关.乏氧可增强人肝癌HepG2细胞的增殖迁移能力,其机制可能与HDAC6基因的表达下调有关.