FGD4/细胞分裂周期蛋白42通路调控良性前列腺增生-1细胞增殖、凋亡的机制

目的 探讨FGD4/细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)通路对良性前列腺增生(BPH)-1细胞增殖、凋亡的影响.方法 选取2017年8月至2018年8月空军军医大学西京医院收治的行尿道前列腺电切术的42例BPH患者的BPH组织作为前列腺增生组,选择同期同一医院收治的行膀胱癌根治术的25例膀胱癌患者的正常前列腺组织作为正常前列腺组;并体外培养BPH-1细胞,分为对照组、siRNA NC组(转染siRNA NC)、FGD4 siRNA组(转染FGD4 siRNA)、Cdc42 NC组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1)和pcDNA3.1-Cdc42组(转染FGD4 siRNA+pcDNA3.1-Cdc42).采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测组织和细胞中FGD4 mRNA、Cdc42 mRNA的表达水平;采用CCK-8法检测细胞增殖情况;采用流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-6和IL-8水平;采用蛋白印迹(Western blot)法检测FGD4、Cdc42、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达情况.结果 与正常前列腺组相比,前列腺增生组组织中FGD4、Cdc42蛋白水平升高(P<0.05).与siRNA NC组相比,FGD4 siRNA组BPH-1细胞中FGD4 mRNA、Cdc42 mRNA水平,细胞吸光度(OD)值,S期细胞、G2/M期细胞占比,细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-8水平及细胞中FGD4、Cdc42、Bcl-2、PCNA蛋白水平均降低(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞占比及细胞中Bax蛋白水平均升高(P<0.05);对照组与siRNA NC组以上指标比较,差异无统计学意义(P>0.05);与Cdc42 NC组相比,pcDNA3.1-Cdc42组BPH-1细胞中Cdc42 mRNA水平,细胞OD值,S期细胞、G2/M期细胞占比,细胞上清液中TNF-α、IL-6和IL-8水平及细胞中Cdc42、Bcl-2、PCNA蛋白水平均显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞占比及细胞中Bax蛋白水平均显著降低(P<0.05);FGD4 siRNA组与Cdc42 NC组以上指标比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 FGD4、Cdc42蛋白在BPH-1细胞中高表达,FGD4可能通过促进Cdc42的表达影响BPH-1细胞周期进程,促进其增殖,同时抑制其凋亡.