热聚体Thermosome蛋白的纯化与组装体表征

目的 表达纯化热聚体Thermosome蛋白,探讨Thermosome蛋白组装体基本特性与细胞相容性.方法 将Thermosome原核表达质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,诱导表达Thermosome的α和β亚基蛋白,利用凝胶过滤层析法纯化目的蛋白;利用动态光散射和透射电子显微镜分析Thermosome蛋白组装体的粒径和形貌特征;通过MTT法检测Thermosome蛋白组装体的细胞相容性.结果 SDS-PAGE结果显示,Thermosome的α和β亚基以可溶性蛋白在BL21大肠杆菌中表达,凝胶过滤层析得到了较高纯度的α和β亚基蛋白;动态光散射结果显示Thermosome蛋白组装体尺寸为20.2 nm,组装体在透射电镜下呈现中空球形结构;MTT结果显示Thermosome纳米粒处理后细胞存活率接近100％;绿色荧光标记的纳米粒能够被细胞摄取进入细胞内.结论 本研究成功表达纯化Thermosome的α和β亚基蛋白,得到平均粒径在20.2 nm的中空笼状自组装纳米颗粒;Thermosome蛋白纳米颗粒具有良好生物相容性,能够被肿瘤细胞高效摄取.