聚核糖性死亡在低氧复合丙泊酚致PC12细胞损伤中的作用

目的 探讨聚核糖性死亡在低氧环境下丙泊酚致PC12细胞损伤中的作用.方法 采用经神经生长因子(nerve growth factor,NGF)诱导分化后的PC12细胞模型,用随机数字表法将细胞分为对照(NC)组(正常培养)、脂肪乳空气对照(CA)组、脂肪乳低氧对照(CH)组、丙泊酚空气(PA)组、丙泊酚低氧(PH)组、3-AB(PARP-1抑制剂)组.采用乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒检测上清液中LDH的水平;流式细胞技术检测细胞凋亡;RT-qPCR法检测多聚ADP核糖聚合酶1(poly ADP-ribose polymerase 1,PARP-1)、细胞凋亡诱导因子(apoptosis-inducing factor,AIF)蛋白的 mRNA 表达水平;Western blot 检测 PARP-1、多聚 ADP 核糖(polymerized ADP-ribose,PAR)及 AIF 蛋白表达水平;细胞免疫荧光技术检测AIF核质分布.结果 与NC、CA组比较,PA、PH组LDH水平及细胞凋亡增多(P＜0.01),PARP-1和AIF的mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.05),胞质PAR聚合物形成增多(P＜0.01),AIF核迁移显著增加(P＜0.01);与CH、PA组比较,PH组LDH水平及细胞凋亡增多(P＜0.01),PARP-1 mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.01),胞质PAR聚合物形成增多(P＜0.01),AIF核迁移增加(P＜0.01);使用PARP-1抑制剂3-AB预处理可降低低氧复合丙泊酚引起的LDH水平及细胞凋亡增加(P＜0.01),同时抑制PARP-1、AIF和PAR蛋白表达上调(P＜0.01).结论 低氧环境下丙泊酚可导致PC12细胞发生聚核糖性死亡,抑制聚核糖性死亡可缓解低氧复合丙泊酚对PC12细胞的损伤.