猪瘟病毒免疫过氧化物酶单层细胞试验检测方法的建立

本研究旨在建立一种针对猪瘟病毒测定的免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)方法.通过优化一抗二抗的稀释倍数、细胞接毒时间、细胞固定条件等,建立能够测定猪瘟病毒的特异性方法.结果显示,建立的IPMA检测方法最优反应条件为接种CSFV,37℃、5％CO2培养72 h后,用含0.3％H2O2的甲醇溶液固定10 min,5％BSA封闭处理,1:200倍稀释的高免血清作用2 h,以1:1000倍稀释羊抗兔HRP-IgG作为二抗作用1 h,AEC 37℃显色15 min.结论:成功建立能够快速对猪瘟病毒含量测定的方法,该方法特异性强、操作方便,可以在生产过程中对猪瘟病毒的产毒情况进行监测.