二乙基二硫代氨基甲酸对肝星状细胞脂滴蛋白Perilipin 5表达及活化的影响

目的 探讨二乙基二硫代氨基甲酸(DDC)对肝星状细胞(HSCs)中脂滴蛋白Perilipin 5(Plin5)表达的调控作用及对HSCs活化的影响.方法 将雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为3组:对照组给予正常饮食喂养;模型组给予胆碱缺乏、L-氨基酸替代蛋白饲料(CDAA)喂养,建立非酒精性脂肪性肝炎(NASH)纤维化模型;治疗组给予DDC灌胃治疗.GFAP和Plin5免疫荧光双染观察小鼠肝组织HSCs中Plin5表达,明确DDC对HSCs中Plin5表达的调控作用.应用DDC处理人肝星状细胞系LX-2,Real-time PCR方法检测Plin5表达,脂滴染色观察脂滴变化,明确DDC对LX-2细胞Plin5表达及脂滴形成的影响;Real-time PCR方法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅲ型胶原等的表达,明确DDC对LX-2细胞活化的影响.结果 在CDAA饮食诱导的NASH肝纤维化小鼠肝组织中,Plin5在HSCs中的表达较对照组显著降低;与模型组相比,DDC治疗组小鼠肝组织中Plin5在HSCs中表达显著升高.与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时,Plin5的mRNA相对表达量均显著增高(1.00±0.15 vs.1.93±0.70;1.00±0.33 vs.1.86±0.09),差异有统计学意义(P<0.05).同时,LX-2脂滴染色结果显示,与对照相比,DDC组处理后LX-2细胞中脂滴数量显著增多[(0.71±0.12)％vs.(1.32±0.15)％],差异有统计学意义(P<0.05),且脂滴多位于细胞核周围,提示DDC可促进LX-2细胞恢复静止状态.与对照组相比,DDC组处理12 h及24 h时可显著抑制LX-2细胞中α-SMA、Ⅲ型胶原表达(1.00±0.07 vs.0.36±0.21;1.00±0.12 vs.0.66±0.02;1.00±0.04 vs.0.63±0.26;1.00±0.15 vs.0.76±0.07),差异均有统计学意义(P<0.05),提示DDC可抑制LX-2活化.结论 DDC可以上调HSCs中Plin5表达,促进脂滴形成并抑制HSCs活化.