1-硝基芘对GC-2细胞的损伤效应及AhR信号通路的活化

目的 研究1-硝基芘(1-nitropyrene,1-NP)对小鼠精母细胞株GC-2的损伤效应及芳香烃受体(aryl hydro-carbon receptor,AhR)信号通路的影响.方法 建立不同剂量1-NP染毒的GC-2细胞模型,采用CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Western blot分析各组细胞DNA双链断裂损伤标志物γ-H2AX、DNA损伤反应通路蛋白以及AhR通路蛋白的表达.实时荧光定量PCR检测细胞色素450(CYP)1a1和1b1 mRNA表达水平.结果 1-NP处理可导致GC-2细胞活性降低及G2/M期细胞比例升高,同时诱导γ-H2AX蛋白表达升高,DNA损伤反应及细胞周期G2/M期检测点蛋白ATM、Chk1、Cdc25c、Cdc2的磷酸化表达水平升高,Cyclin B1表达降低.1-NP染毒也提高了GC-2细胞中AhR核蛋白及下游靶基因CYP1A1的蛋白表达,提高了 Cyp1a1和Cyp1b1的转录表达水平.结论 1-NP暴露造成小鼠生精细胞的DNA损伤、细胞周期阻滞和细胞活性抑制,其效应可能与AhR信号通路的活化及对化学物的代谢活化有关.