SMAD5-AS1干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响及机制

目的 观察长链非编码核糖核酸(LncRNA)信号传导蛋白Sma和Mad相关蛋白同源物5(SMAD5)反义核糖核酸1(SMAD5-AS1)干扰对人食管癌细胞株Eca109增殖的影响,并初步探讨可能的机制.方法 取人食管癌细胞株Eca109培养传代,分别转染SMAD5-AS1 siRNA沉默质粒、阴性对照质粒,并记为siRNA-1组、siRNA阴性对照组,另取未转染细胞记为对照组,每组设置3个复孔.实时逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测各组SMAD5-AS1、表观遗传诱导LncRNA-1(EPIC1)信使核糖核酸(mRNA)表达;细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测各组细胞增殖活性;流式细胞仪检测各组细胞周期分布;RT-qPCR检测各组细胞细胞周期D1(cyclinD1)、促凋亡基因(Bad)、抗凋亡基因(Bcl-2)mRNA表达;蛋白质免疫印迹法(WB)检测各组细胞cyclinD1、Bad、Bcl-2蛋白表达.结果 各组细胞SMAD5-AS1、EPIC1 mRNA表达水平比较:对照组>siRNA阴性对照组>siRNA-1组,差异有统计学意义(P<0.05);各组细胞增殖活性比较:siRNA-1组>siRNA阴性对照组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组和siRNA阴性对照组比较,siRNA-1组cyclinD1和Bcl-2 mRNA与蛋白表达均下降,差异有统计学意义(P<0.05),G1/S期细胞占比、Bad mRNA及蛋白表达均升高,差异有统计学意义(P<0.05),上述指标siRNA阴性对照组和对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论 SMAD5-AS1干扰可抑制人食管癌细胞株Eca109增殖,将其阻滞于G1/S期,推测与下调EPIC1、cyclinD1及Bcl-2表达,上调Bad表达有关.