黄芩苷通过Ebf3基因调控骨髓间充质干细胞成骨分化

目的 探究黄芩苷(BC)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖和成骨分化的影响及其作用机制.方法 用成骨诱导液诱导BMSCs细胞发生成骨分化;不同浓度的BC(50、100、500 ng/ml)处理诱导的BMSCs细胞,筛选最适浓度100 ng/ml.脂质体法转染细胞,分为pcDNA组(转染pcDNA)、pcDNA-Ebf3组(转染pcDNA-Ebf3)、si-NC组(转染si-NC)、si-Ebf3组(转染si-Ebf3)、BC+si-NC组(转染si-NC再用BC处理)、BC+si-Ebf3组(转染si-Ebf3再用BC处理);细胞计数试剂盒(CCK)-8法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)法、Western印迹分别检测细胞的存活率、碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(Osteocalcin)含量、Ebf3的mRNA和蛋白表达.结果 BC(100、500 ng/ml)处理的诱导BMSCs细胞的存活率明显上升,ALP和Osteocalcin也发生明显的上调,Ebf3的mRNA和蛋白表达均显著上调(P<0.05).过表达Ebf3促进诱导BMSCs细胞的存活并上调ALP、Osteocalcin,而敲减Ebf3则具有相反的作用(P<0.05).敲减Ebf3还可明显减弱BC对诱导BMSCs细胞的存活和ALP、Osteocalcin表达上调作用(P<0.05).结论 黄BC可促进成骨诱导的BMSCs细胞增殖和成骨分化,其机制与上调Ebf3有关.