玉米赤霉烯酮对鸡胚成纤维细胞的毒性作用

旨在探究玉米赤霉烯酮(ZEA)对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的毒性作用机制,采用MTT法检测细胞活力变化,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活力,ELISA法检测Caspase-3含量,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,荧光显微镜观察细胞活性氧(ROS)水平,线粒体膜电位变化,RT-qPCR法检测内质网应激(ERs)和细胞凋亡相关基因的mRNA转录水平.结果显示,12.5～50.0μg·mL-1 ZEA显著抑制DF-1细胞增殖(P＜0.01),且呈时间和剂量依赖性关系.25.0μg·mL-1 ZEA处理细胞24 h后,上清液中LDH和Caspase-3含量显著升高(P＜0.01);细胞中ROS水平和细胞凋亡数量极显著升高(P＜0.01);线粒体膜电位极显著降低(P＜0.01).凋亡相关基因Caspase-3、Bax mRNA转录水平极显著上调(P＜0.01),Bcl-2 mRNA转录水平极显著下调(P＜0.01);ERs相关基因GRP78、A TF6、A TF4、CHOP、PERK mRNA转录水平极显著上调(P＜0.01).综上表明,ZEA能通过内质网应激途径导致细胞凋亡并对鸡胚成纤维细胞发挥毒性作用.研究结果为深入研究ZEA对鸡细胞的毒性作用和解毒手段奠定基础,对相关禽类疾病治疗具有意义.