睡眠干扰调控5-羟色胺2A受体表达抑制动物骨骼增长的机制及miRNA筛选研究

目的:研究5-羟色胺2A受体在睡眠干扰中抑制动物骨骼增长的作用并筛选靶向5-羟色胺2A受体调控其表达的miRNA.方法:通过对小鼠进行睡眠干扰,观察其对小鼠体长增长、5-羟色胺2A受体表达、生长激素分泌的影响;同时通过对大鼠进行睡眠干扰,测量其对大鼠慢波睡眠、异相睡眠等各类型睡眠时长的影响;采用芯片法筛选睡眠干扰后引起小鼠体长差异表达的miRNA,利用RnaDB网站筛选调节5-羟色胺2A受体表达的miRNA,对得到的两组miRNA进行比较,得到重合的miRNA并进行qRT-PCR验证,从而筛选出通过对睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达抑制动物骨骼增长的miR-NA.结果:睡眠干扰20 d后,明显抑制小鼠体长增长,同时显著增加小鼠脑组织5-羟色胺2A受体表达,降低体内生长激素分泌,与空白对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).同时,睡眠干扰能明显减少大鼠慢波睡眠和总睡眠时长(P＜0.05),但在异相睡眠时长上无明显影响(P＞0.05).在miRNA筛选研究方面,芯片法共获得16个符合差异倍数的miRNA,其中表达上调13个,表达下调3个,利用RnaDH网站筛选与芯片法筛选重合的miRNA为miR-200c-3p,对其进行qRT-PCR法验证结果显示其确能引起睡眠干扰组与空白对照组差异表达,因此miR-200c-3p可能为睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达进而抑制动物骨骼增长的核心靶点之一.结论:睡眠干扰能够抑制动物骨骼增长,其机制可能与睡眠干扰引起5-羟色胺2A受体高表达,导致慢波睡眠减少,从而降低生长激素分泌有关,通过miR-NA 筛选及qRT-PCR验证显示,miR-200c-3p可能是其核心靶点之一.