浮游状态和生物膜状态白念珠菌总RNA提取方法的比较研究

目的 本研究通过比较不同方法提取生物膜和浮游状态白念珠菌总RNA,以提供一种优化提取白念珠菌总RNA的有效方法.方法 将白念珠菌标准株SC5314在生物膜和浮游状态下培养24 h后,分别采用改良Trizol法和改良热酸酶酚法提取白念珠菌总RNA,用紫外分光光度计检测其纯度和浓度,琼脂糖凝胶电泳检测RNA的完整性,通过逆转录PCR反应验证总RNA的完整性及质量.结果 与改良热酸酶酚法相比,采用改良Trizol法提取白念珠菌总RNA操作时间较少(P<0.0005),提取的总RNA纯度较高(P<0.05).琼脂糖凝胶电泳显示两种方法提取的白念珠菌总RNA均呈现28S rRNA、18S rRNA和5S rRNA共3条清晰的条带,逆转录PCR反应也都获得清晰的目的条带.结论 改良Trizol法提取白念珠菌成熟期生物膜和浮游状态白念珠菌总RNA的纯度稳定,目前是一种高效、快捷、易于掌握的提取方法.