间充质干细胞来源外泌体对视网膜光感受器细胞PI3K/AKT通路及Ang-1蛋白水平作用的研究

目的 探讨间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)下外泌体对视网膜光感受器细胞PI3K/AKT通路及Ang-1蛋白水平的影响.方法 应用免疫印迹检测人脐带间充质干细胞(human umbilical cord derived mes-enchymal stem cells,h UCMSCs)外泌体表面标志蛋白CD63及CD90,应用流式细胞仪检测光损伤661W细胞凋亡,应用免疫荧光检测Ang-1,应用免疫印迹检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达.结果 形态学及免疫印迹检测CD63、CD90表达结果证实h UCMSCs外泌体.线粒体膜电位检测结果以及细胞形态学鉴定661W细胞建立光损伤模型成功.流式细胞仪、免疫荧光检测结果显示,与正常组比较模型组细胞凋亡率及Ang-1阳性表达增加,在经过h UCMSCs干预后有所降低,且呈现出明显的浓度依赖性(P<0.05).免疫印迹结果显示,与正常组比较,模型组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达降低,经过h UCMSCs干预后有所升高(P<0.05),且高浓度组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达水平与激动剂组比较无差异(P>0.05),模型组PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT表达水平高于抑制剂组(P<0.05).结论 间充质干细胞下外泌体可能是通过激活PI3K/AKT通路,抑制了视网膜光感受器细胞的凋亡以及Ang-1的水平,从而对光损伤视网膜起保护作用.