微纤丝相关蛋白4在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义
Chinese Journal of Experimental Surgery(2022)
摘要
目的:探讨微纤丝相关蛋白4(MFAP4)对肾透明细胞癌(ccRCC)的作用及其机制。方法:2020年6月至2020年12月武汉大学人民医院泌尿外科收集的30对肾癌组织及细胞标本,通过实时定量免疫荧光PCR和免疫印迹方法检测MFAP4蛋白表达量;利用腺病毒构建过表达MFAP4稳转肿瘤细胞株,通过细胞迁移和侵袭实验检测MFAP4对ccRCC细胞株的影响,利用免疫荧光和免疫印迹技术检测MFAP4对ccRCC的作用机制。多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用
t检验。
结果:在肾癌组织样本和肾肿瘤细胞株中MFAP4的转录水平(转录表达值:5.22±2.61比32.08±7.12,
t=17.68,
P<0.05)和蛋白水平表达量(条带相对灰度值:1.00±0.01比2.30±0.25,
t=9.18,
P<0.05)显著高于正常组。同时,MFAP4过表达组ccRCC侵袭细胞数量显著高于转染对照组(细胞数:907±63比1 997±101,
t=12.87,
P<0.05;1 208±98比2 364±121,
t=15.87,
P<0.05),免疫荧光和免疫印迹结果提示,过表达MFAP4降低LC3B表达量(条带相对灰度值:1.00±0.01比0.65±0.08,
t=46.42,
P<0.05;1.00±0.01比0.67±0.06,
t=26.46,
P<0.05),促进p62表达(条带相对灰度值:1.00±0.01比2.27±0.04,
t=7.93,
P<0.05;1.00±0.01比2.17±0.08,
t=9.15,
P<0.05)。
结论:MFAP4可能通过抑制细胞自噬促进肾癌进展。
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关键词
Microfibril-associated protein 4,Clear cell renal cell carcinoma,Autophagy
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