肺肠合治法对支气管哮喘小鼠血管活性肠肽和p38 MAPK信号通路的影响

目的:观察中医治疗肺系疾病的常用治法肺肠合治法对支气管哮喘小鼠的治疗作用,进一步检测与哮喘发病机制密切相关的血管活性肠肽(VIP)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路相关蛋白的变化,以阐明肺肠合治法治疗支气管哮喘的作用机制.方法:将60只昆明种小鼠随机选12只作为正常组.其余小鼠通过卵清蛋白致敏复制小鼠支气管哮喘模型.分为正常组、模型组、地塞米松组(0.5mg·kg-1·d-1)、中药治肺组(2.73g·kg4·d-1)、肺肠合治组(6.825 g·kg-1·d-1),灌胃30 d后取血清及肺组织样本.酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组小鼠血清中VIP、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测各组小鼠肺组织中TNF-α、IL-6、p38 MAPK mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组小鼠肺组织中TNF-α、IL-6、p38 MAPK,磷酸化p38 MAPK(p-p38 MAPK)蛋白的表达.结果:与正常组比较,模型组小鼠血清VIP含量明显降低(P＜0.05),TNF-α、IL-6含量明显升高(P＜0.05),肺组织TNF-α、IL-6、p38 MAPK mRNA 和 TNF-α、IL-6、p-p38 MAPK/p38 MAPK 蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05);与模型组比较,各治疗组小鼠血清VIP含量明显升高(P＜0.05),TNF-α、IL-6含量明显升高(P＜0.05),肺组织TNF-α、IL-6、p38MAPK mRNA和TNF-α、IL-6、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白相对表达量明显降低(P＜0.05);与肺肠合治组比较,地塞米松组小鼠血清TNF-α、IL-6明显增高(P＜0.05),肺组织TNF-α、IL-6 mRNA和TNF-α、IL-6蛋白相对表达量明显降低(P＜0.05),肺组织p38 MAPK、VIP mRNA和p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白相对表达量明显升高(P＜0.05),中药治肺组小鼠血清VIP、TNF-α、IL-6明显降低(P＜0.05),肺组织TNF-α、IL-6、p38MAPK mRNA和TNF-α、IL-6、p-p38 MAPK/p38 MAPK蛋白相对表达量均明显升高(P＜0.05),肺组织VIP mRNA表达水平明显降低(P＜0.05).结论:肺肠合治法可以增加内源性VIP,抑制p38 MAPK信号通路的过度活化,减少炎症因子释放,抑制肺部炎症反应,治疗支气管哮喘.