肺肠合治法对LPS诱导急性肺损伤大鼠NF-κB炎症通路和巨噬细胞极化的影响

目的:探究肺肠合治法(麻黄汤+大承气汤)对脂多糖(LPS)诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠的作用与保护机制.方法:将Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、肺肠合治低、中、高剂量组、地塞米松组.通过LPS(10 mg·kg-1)腹腔注射成功复制ALI大鼠模型.观察与记录各组大鼠一般状态;采用肛温测量法记录各组大鼠造模后0～8 h体温数值;造模后24 h取材,收集血清与肺组织.酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸酶-1(Arg-1)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠肺组织中核转录因子-κB p65(NF-κB p65)、磷酸化核转录因子-κB p65(p-NF-κB p65)、核转录因子抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化核转录因子抑制蛋白α(p-IκBα)蛋白的表达量;免疫荧光双标检测大鼠肺组织经典激活型(M1)巨噬细胞标记物CD80、IL-1β、巨噬细胞标记物F4/80、IL-10表达.结果:与正常组比较,模型组大鼠体温和热效应指数(TRI)显著升高,血清促炎因子TNF-α、IL-1β和抗炎因子IL-10水平显著升高(P＜0.01),肺组织p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达显著升高(P＜0.01),肺组织巨噬细胞标志物F4/80、M1巨噬细胞标志物CD80和IL-1β的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,肺肠合治各组和地塞米松组大鼠体温与TRI指数降低(P＜0.01),血清炎症因子 TNF-α、IL-1β水平降低(P＜0.05,P＜0.01),血清抗炎因子 IL-10、Arg-1 水平升高(P＜0.05,P＜0.01),肺组织 p-NF-κB p65、p-IκBα蛋白表达降低(P＜0.05,P＜0.01),肺组织M1巨噬细胞标志物CD80、IL-1β表达显著降低和IL-10表达显著升高(P＜0.01),巨噬细胞标志物F4/80表达无明显变化.结论:肺肠合治方剂对ALI大鼠的发热与炎症状态有明显的改善,其机制可能与NF-κB炎症通路被抑制,肺组织巨噬细胞向抗炎表型极化有关.