IDO1抑制剂联合替莫唑胺对人脑胶质瘤的协同抗肿瘤作用研究

本研究主要研究新型吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)抑制剂NLG-919联合化疗药物替莫唑胺对人脑胶质瘤的生长抑制作用及其作用机制.通过MTT法检测NLG-919和替莫唑胺单独使用及联合使用后的肿瘤生长作用;通过集落形成实验、侵袭实验和迁移实验检测NLG-919和替莫唑胺单独使用及联合使用后对人脑胶质瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响;采用流式细胞术进行细胞凋亡、周期、活性氧(ROS)产生以及线粒体膜电位(JC-1)检测实验,比较单独用药和联合用药的抗肿瘤效果;通过免疫荧光实验检测IDO1的表达水平和高效液相色谱仪检测犬尿氨酸表达水平探究NLG-919协同替莫唑胺的抗肿瘤作用机制.结果显示,相比于替莫唑胺,NLG-919具有较弱的体外增殖抑制作用,其作用于U251细胞和U87细胞72h后的半数抑制浓度(IC50)分别是26.9和30.7 μmol·L-1,但当其与化疗药物替莫唑胺联合使用后可显著增加替莫唑胺的抗胶质瘤活性.与单独用药相比,联合用药组具有更强的抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移的能力.联合用药提高了替莫唑胺诱导细胞凋亡的能力,其作用机制可能与诱导ROS的增加以及线粒体膜电位的损伤有关,同时,联合用药提高了替莫唑胺诱导细胞周期阻滞的能力,抑制胶质瘤的生长.此外,NLG-919可以显著下调人脑胶质瘤细胞的IDO1表达,在与替莫唑胺联用后抑制效果有所增强,并且有效地阻断色氨酸代谢产生犬尿氨酸.总之,IDO1抑制剂NLG-919和替莫唑胺在抗癌治疗方面表现出显著的协同作用,为人脑胶质瘤的临床联合治疗候选药物提供了选择基础.