血管活性肠肽对肺泡巨噬细胞活化和p38MAPK信号通路影响的实验研究

目的 研究血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)对肺泡巨噬细胞活化的影响.方法 原代小鼠肺泡巨噬细胞分为Normal组(正常对照)、LPS组(脂多糖刺激巨噬细胞活化)、LPS+VIP组(脂多糖刺激巨噬细胞活化后,10-6mol/LVIP干预).3 C57BL/6小鼠随机分为Normal组(正常对照),ALI组(急性肺损伤),ALI+VIP组(急性肺损伤后,10-8 mol/L VIP气管滴入).免疫荧光法检测肺泡巨噬细胞标记物CD86和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;ELISA法检测细胞培养上清和血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6的含量;RT-PCR法检测巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinase,MAPK)mRNA的表达水平;Western blot法检测各组巨噬细胞和肺组织内TNF-α、IL-6、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白的表达.结果 与Normal组比较,经LPS刺激后,ALI组小鼠肺组织肺泡巨噬细胞和LPS组原代肺泡巨噬细胞活化增强,小鼠血清和细胞培养上清中TNF-α、IL-6含量升高,肺组织和巨噬细胞中TNF-α、IL-6、p-p38MAPK、p38MAPK蛋白和TNF-α、IL-6、p38MAPK mRNA的相对表达增高.与ALI和LPS组比较,VIP干预后,ALI+VIP和LPS+VIP组肺泡巨噬细胞活化被抑制,血清和细胞培养上清中TNF-α、IL-6含量降低,肺组织和细胞中TNF-α、IL-6、p38MAPK、p-p38MAPK蛋白和TNF-α、IL-6、p38MAPKmRNA的相对表达降低.结论 VIP能抑制肺泡巨噬细胞活化,减少炎症因子IL-6、TNF-α的激活和释放,其机制可能与p38MAPK信号通路相关.