低氧诱导因子-1α介导的微小RNA-210对胃癌细胞增殖与转移功能的影响及机制

目的:观察低氧微环境对胃癌细胞增殖、转移功能的影响，并探讨其相关的分子学机制。方法:细胞增殖检测试剂盒(CCK-8)、Transwell法检测SGC-7901细胞经低氧处理后的增殖、迁移及侵袭能力，应用高通量测序(Illumina Hiseq)对低氧处理后的微小RNA(miRNA，miR)差异基因进行检测；实时定量聚合酶链反应(RT-PCR)法、干扰低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达法验证低氧环境下HIF-1α诱导miR-210的能力；后在正常胃黏膜组织、胃癌及癌周组织中检测miR-210的表达，分析其表达量与患者临床病理学特征之间相关性；接下来进一步在体外上调/抑制miR-210后，应用CCK-8、Transwell检测miR-210对胃癌细胞株AGS、SGC-7901增殖、迁移及侵袭能力的影响；后应用生物信息分析、报告基因实验、蛋白质免疫印迹(Western blot)及靶基因干扰实验探讨其发挥功能的具体分子学机制。两组间比较采用 t检验。 结果:与常氧组比较，低氧可明显促进SGC-7901细胞的增殖(0.43±0.13比0.56±0.17， t＝5.43， P<0.05)、迁移(250±28比390±30， t＝10.28， P<0.05)及侵袭能力(220±40比310±45， t＝9.74， P<0.05)；miR-210低氧处理后显著上调的差异miRNA之一；低氧在胃癌细胞中可通过HIF-1α诱导miR-210的表达；胃癌组织中异常表达的miR-210与肿瘤的大小及临床分期相关( P<0.05)；与对照组比较，过表达miR-210可明显促进AGS与SGC-7901细胞的增殖(0.58±0.16比0.73±0.21， t＝6.58， P<0.05)、(0.53±0.11比0.63±0.25， t＝7.18， P<0.05)，迁移(200±20比295±35， t＝8.36， P<0.05)、(185±20比260±10， t＝7.54， P<0.05)，及侵袭(150±25比215±30， t＝5.87， P<0.05)、(145±25比190±30， t＝4.37， P<0.05)能力，而其拮抗剂却显著抑制胃癌细胞的上述恶性能力；最后Western blot等研究表明磷脂酶和张力蛋白同源物(PTEN)是miR-210在胃癌细胞中发挥促癌功能的靶基因。 结论:低氧环境下HIF-1α介导miR-210可通过靶向调控PTEN的表达促进胃癌细胞的增殖及转移能力。