通俗环毛蚓抗血栓活性蛋白成分的快速富集及活性考察

目的:以地龙品种中的通俗环毛蚓为研究对象,对其蛋白总提物进行纯化富集以获得抗血栓活性蛋白成分(PvQ),对PvQ进行抗血栓活性研究,以期为地龙的抗血栓物质基础研究提供参考.方法:采用AKTA-Pure型蛋白纯化系统,以体外活性为导向,富集通俗环毛蚓PvQ;采用纤维蛋白平板法、纤维蛋白原-凝血酶时间法(Fibg-TT法)对PvQ的纤溶及抗凝活性进行测定;利用体外血栓溶解试验评价PvQ对体外血栓的溶解能力,同时,考察了不同温度及pH对PvQ活性的影响.结果:成功富集得到通俗环毛蚓PvQ,活性测定表明其具有显著的纤溶及抗凝活性.体外血栓试验结果显示,37℃孵育5h后PvQ可水解超过80％的血栓块.此外,温度和pH对于PvQ活性影响显著,在≥60℃或酸性条件(pH＜7)下PvQ活性显著降低或失活,而在≤50℃和碱性条件下PvQ活性则不受影响或受较少影响.结论:建立了可行的通俗环毛蚓PvQ制备方法,PvQ可同时作用于纤维蛋白和纤维蛋白原,从而发挥双重纤溶作用,表现出良好的纤溶及抗凝活性,为其用于治疗血栓性疾病提供了科学阐释,并可为地龙抗血栓蛋白类产品的开发提供参考.