逍遥散促进小胶质细胞极化改善血管性痴呆伴抑郁小鼠髓鞘再生及抑郁表型

目的:探讨逍遥散对血管性痴呆(VaD)小鼠抑郁行为表型的作用及可能机制.方法:3月龄雄性C57/BL6小鼠60只,分为正常组、模型组、氟西汀组及逍遥散低、中、高剂量组.除正常组外,其余5组小鼠采用双侧颈总动脉狭窄术,术后2周开始给予慢性束缚应激,每天6h,构建VaD伴抑郁小鼠模型;逍遥散低、中、高组予逍遥散水煎剂(5,10,20 g·kg-1)灌胃,氟西汀组给予氟西汀(10 mg· kg-1)灌胃,正常组、模型组给予等体积生理盐水灌胃,共计4周,给药期间给予束缚应激维持;糖水偏好试验、悬尾试验检测小鼠抑郁行为表型,免疫荧光法检测小鼠腹侧海马(vHIP)髓鞘碱性蛋白(MBP)荧光表达水平;透射电镜观察小鼠vHIP髓鞘超微结构;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测MBP,少突胶质细胞糖蛋白(MOG),髓鞘相关醣蛋白(MAG),髓样细胞触发性受体-2(TREM2),诱导型一氧化氮合酶(iNoS),精氨酸酶1(Arg1),白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-4(IL-4),白细胞介素-10(IL-10)蛋白表达水平.结果:行为学检测结果显示:与正常组比较,模型组小鼠不动时间增加、糖水偏好百分比下降(P＜0.01);与模型组比较,给予逍遥散干预后小鼠不动时间缩短(P＜0.05),糖水偏好百分比增加(P＜0.01);Western blot结果显示:与正常组比较,模型组小鼠vHIP中髓鞘相关蛋白(MBP,MOG,MAG)表达下降(P＜0.01);与模型组比较,低剂量组小鼠vHIP中MBP,MOG,MAG蛋白表达增加(P＜0.05,P＜0.01),iNOS蛋白表达降低(P＜0.01),中、高剂量组MBP,MOG,MAG,TREM2,Arg1,IL-4,IL-10蛋白表达均增加(P＜0.05,P＜0.01),iNOS,IL-1β,TNF-α蛋白表达水平降低(P＜0.01);免疫荧光结果显示:与正常组比较,模型组小鼠MBP平均荧光强度降低(P＜0.01),低、中、高剂量组MBP平均荧光强度不同程度增加(P＜0.01);透射电镜结果显示:模型组髓鞘结构松解,致密层分离,排列紊乱,给予逍遥散干预改善小鼠髓鞘结构完整性及板层结构松散度.结论:逍遥散改善VaD小鼠的抑郁表型,其机制可能是通过上调TREM2诱导小胶质细胞M2型极化,增加其抗炎及吞噬能力,促进受损髓鞘再生.