丁苯酞联合TLR4抗体鼓室给药小鼠梅尼埃病模型的实验研究

目的 研究丁苯酞联合TLR4抗体通过调控Hsp70通道蛋白表达对内淋巴积水(Endolymphatic hydrops,ELH)小鼠模型的诊疗价值.方法 选取50只BALB/c雌性小鼠,并随机分为对照组(A组)、模型组(B组)、和实验组(C组).对照组不予任何处理;模型组予内淋巴积水造模;实验组在模型组基础上2天后:A组予以鼓室注射TLR4抗体50μg+丁苯酞25mg/kg灌胃干预;B组予以鼓室注射TLR4抗体100μg+丁苯酞100mg/kg灌胃干预;C组予以鼓室注射TLR4抗体200μg+丁苯酞100mg/kg灌胃干预.连续干预4周.随后观察小鼠行为学改变,耳蜗切片Hsp70表达,测试耳蜗电图SP/AP值.检测MD小鼠在丁苯酞联合TLR4抗体干预前后血清Hsp70水平及TNF-α、IL-6炎性细胞因子表达.结果 与对照组比较,模型组小鼠诱发出明显外周前庭症状,符合MD(Ménière's Disease)动物造模改变;与模型组比较,实验组3个亚组经4w鼓室注射TLR4抗体50、100、200μg+丁苯酞25、100、100mg/kg灌胃干预后,小鼠前庭反应都明显减轻,模型组与实验组耳蜗电图SP/AP值分别为0.4169±0.13,0.3271±0.12,两者差异无统计学意义(P>0.05);耳蜗切片Hsp70表达可见耳蜗螺旋神经节和血管纹细胞在实验组呈较强阳性染色,模型组呈强阳性染色,两者对比有统计学意义(P<0.05).小鼠血清中Hsp70蛋白、TNF-α及IL-6水平较模型组显著减低,两者比较有统计学意义(P<0.05);实验A组与B组相比,随TLR4抗体鼓室注射及丁苯酞灌胃剂量增加,上述指标水平下降.而实验B组与C组相比,当丁苯酞灌胃剂量不变,继续增加TLR4鼓室注射浓度至200μg时,上述指标水平继续下降.结论 丁苯酞联合TLR4抗体鼓室给药可明显干预TLR4/Hsp70信号传导通路在MD小鼠内耳的表达.当TLR4抗体鼓室注射浓度增为200μg,对血清Hsp70表达及减轻炎性因子水平的干预作用最大.