鸡宿主限制因子SAMHD1单克隆抗体的制备与鉴定

为探讨鸡源宿主限制因子SAMHD1(chSAMHD1)的功能及作用机制,研究将前期制备并纯化的chSAMHD1原核表达蛋白免疫8周龄BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选单克隆抗体杂交瘤细胞株,制备抗chSAMHD1单克隆抗体.结果显示:经间接ELISA筛选和2次亚克隆最终获得了5株能稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为1A8-2-1、1A12-1-8、2B9-7-6、1F5-1-4、1F7-7-7,小鼠腹水效价较高的1A8-2-1和2B9-7-6抗体亚型均为IgG1;间接免疫荧光(IFA)和蛋白免疫印迹(Western blot)鉴定结果均表明,单克隆抗体1A8-2-1可特异性识别293T细胞和DF-1细胞过表达的chSAMHD1蛋白.该研究成功获得了特异性抗chSAMHD 1单克隆抗体,可用于ELISA、IFA和Western blot检测,为鸡源SAMHD1蛋白生物学功能的研究奠定基础.