壮药华佗豆不同极性部位HPLC指纹图谱的建立及其镇痛抗炎作用的谱效关系

目的:建立壮药华佗豆不同极性部位的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,并研究其与镇痛抗炎作用的谱效关系.方法:制备华佗豆总部位及乙酸乙酯、正丁醇、水部位.采用HPLC法进行测定并结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012A版)建立不同极性部位的HPLC指纹图谱,并进行共有峰指认.以小鼠扭体次数和耳肿胀度为镇痛抗炎指标,考察华佗豆不同极性部位的镇痛抗炎活性;采用灰色关联度分析法、双关变量分析法、偏最小二乘法(PLS)分析各极性部位HPLC指纹图谱中共有峰与镇痛抗炎指标的相关性.结果:华佗豆不同极性部位共有11个共有峰,指认了5个成分,分别为新绿原酸(3号峰)、绿原酸(5号峰)、隐绿原酸(6号峰)、异绿原酸A(10号峰)、异绿原酸C(11号峰).经灰色关联度分析发现,所有共有峰与镇痛抗炎作用的关联度均大于0.6(除6号峰与镇痛作用的关联度外),呈相关性;3、7、10号峰与镇痛抗炎作用的关联度均大于0.8,呈高度相关性.经双关变量分析发现,1、3、4、7、9、10、11号峰与镇痛抗炎作用的相关系数均大于0.6,呈相关性.经PLS分析发现,1、3、4、7、9、10、11号峰对镇痛抗炎作用的影响较大.结论:建立了华佗豆不同极性部位的HPLC指纹图谱并指认了5个共有峰成分;新绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸C以及1、4、7、9号峰所代表的化学成分可能是华佗豆发挥镇痛抗炎作用的药效物质.