西南地区有柄石韦UPLC指纹图谱的建立及酚酸类成分的测定

目的:建立西南地区有柄石韦的超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱,并测定其中4种酚酸类成分(新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸)的含量.方法:采用Waters Cortecs T3 C18(100 mm×2.1 mm,1.6μm)色谱柱,以甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.35 mL/min,检测波长为326 nm,柱温为30℃,进样量为1μL.以UPLC法结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)建立有柄石韦的UPLC指纹图谱,采用SPSS 20.0软件对数据进行聚类分析和主成分分析,并利用外标法测定来自西南地区20批有柄石韦中4种酚酸类成分的含量.结果:有柄石韦的UPLC指纹图谱中确定了9个共有峰,指认出峰1、峰3、峰4、峰5、峰9分别为新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸和异绿原酸C;不同批次有柄石韦中各色谱峰相对保留时间的RSD为0～0.68％,相对峰面积的RSD为0～62.35％;20批药材指纹图谱与对照图谱的相似度均不小于0.990.聚类分析结果显示,不同产地的有柄石韦可聚为3类;主成分分析结果表明,不同产地的有柄石韦质量存在一定差异.新绿原酸、咖啡酸、绿原酸、隐绿原酸检测浓度的线性范围分别为0.61～61.41、0.18～17.60、2.00～200.11、0.62～61.51μg/mL(R2均大于0.9999),精密度、重复性和稳定性试验的RSD均小于2.00％,加样回收率为96.23％～98.17％(RSD为0.96％～2.28％,n=6);20批样品中,上述4种酚酸类成分的含量分别为0.3853～1.8919、0.0180～0.1295、2.5695～10.6760、0.5635～1.8605 mg/g.结论:所建UPLC指纹图谱较全面地反映了有柄石韦的主要化学成分.酚酸类成分可作为有柄石韦质量的主要评定指标;西南地区有柄石韦药材的质量高低排序为重庆产药材>四川产药材>贵州产药材.