仙鹤草不同提取部位抗肝纤维化作用的研究

目的 研究仙鹤草不同提取部位的抗肝纤维化作用.方法 以大鼠肝星状细胞HSC-T6为研究对象,检测不同质量浓度(0.5、5、50、500、5000μg/mL,均以生药量计)的仙鹤草不同提取部位(总提取物、乙酸乙酯部位、石油醚部位和正丁醇部位)对该细胞增殖的影响(作用24、48、72 h后),并计算半数抑制浓度(IC50).采用血小板衍生生长因子(PDGF-BB)刺激HSC-T6细胞以复制肝纤维化细胞模型,采用流式细胞仪检测仙鹤草不同提取部位对HSC-T6细胞凋亡的影响,采用酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清液中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)表达水平,采用Western blot法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Col-Ⅰ、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)的表达水平.结果 仙鹤草总提取物、乙酸乙酯部位、石油醚部位和正丁醇部位均可显著升高HSC-T6细胞凋亡率(P<0.01);作用24 h时,上述各部位的IC50分别为50.17、20.75、5.82、4.09μg/mL.经PDGF-BB干预后,HSC-T6细胞培养上清液中Col-Ⅰ和细胞中Col-Ⅰ、α-SMA、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P<0.01);经仙鹤草不同提取部位干预后,HSC-T6细胞培养上清液或细胞中上述蛋白表达水平大部分均较PDGF-BB组显著逆转(P<0.05或P<0.01),其中仙鹤草正丁醇部位干预作用最为显著.结论 仙鹤草不同提取部位均可抑制HSC-T6细胞增殖,并诱导其凋亡;正丁醇部位可能是仙鹤草发挥抗肝纤维化作用的有效部位.