FBW7通过促进NOX1降解抑制ox-LDL诱导的颗粒细胞凋亡
Chinese Journal of Pathophysiology(2020)
摘要
目的:探讨含F框及WD重复结构域蛋白7(F-box and WD repeat domain containing protein 7,FBW7)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipopretion,ox-LDL)诱导的颗粒细胞(granulosa cells,GCs)损伤的影响,并分析其机制.方法:收集从不同肥胖程度育龄期女性分离的GCs、从高脂饮食(high-fatty diet,HFD)喂养大鼠分离的GCs及ox-LDL处理的大鼠GCs,用Western blot法检测FBW7的表达.用编码FBW7的腺病毒载体(Ad-FBW7)感染大鼠GCs后,再用ox-LDL(80 mg/L)处理细胞48 h,分别用CCK-8法、Annexin V/PI染色法、光泽精化学发光法和Western blot法检测细胞活力、细胞凋亡、NADPH氧化酶(NADPH oxidase,NOX)活性和NOX关键亚基的蛋白表达.用环己酰亚胺(cycloheximide,CHX)追踪法评估过表达FBW7对NOX1降解的影响.结果:在肥胖育龄期女性的GCs、HFD喂养大鼠的GCs和ox-LDL处理的GCs中FBW7低表达(P<0.05).过表达FBW7能抑制ox-LDL诱导的GCs损伤、NOX活性和NOX1表达(P<0.05).CHX追踪法实验结果显示,在ox-LDL存在的条件下,过表达FBW7能加速NOX1的降解(P<0.05).结论:过表达FBW7可通过加快NOX1降解而减弱NOX活性,从而减轻ox-LDL导致的GCs损伤.
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