丁苯酞软胶囊通过下调miR-137促进线粒体自噬对帕金森病大鼠发挥保护作用
Chinese Journal of Pathophysiology(2021)
Abstract
目的:探究丁苯酞(NBP)软胶囊对帕金森病(PD)大鼠微小RNA-137(miR-137)和线粒体自噬的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、低剂量(36 mg/kg)NBP组、高剂量(72 mg/kg)NBP组、NBP(72 mg/kg)+Agomir-NC(miRNA阴性对照;10 nmol)组和NBP(72 mg/kg)+Agomir-137(miR-137模拟物;10 nmol)组,每组18只.采用6-羟基多巴胺(6-OHDA)两点注射法制备PD大鼠模型,假手术组除外;治疗结束后,腹腔注射阿朴吗啡(APO)进行旋转诱导实验,并采用转棒实验评估大鼠的精细运动协调性和平衡能力;免疫组化法检测黑质酪氨酸羟化酶(TH;多巴胺能神经元标志物)和α-突触核蛋白(α-Syn)的阳性表达;透射电子显微镜观察纹状体线粒体自噬情况;JC-1法检测脑黑质-纹状体线粒体膜电位(MMP)变化;RT-qPCR检测大脑miR-137表达水平;Western blot检测线粒体自噬相关蛋白[PTEN诱导假定激酶1(PINK1)、泛素连接酶parkin、微管相关蛋白1轻链3(LC3)和p62]表达.结果:NBP能显著减少PD大鼠的旋转圈数,延长转棒实验掉落潜伏期,增加脑黑质TH的阳性表达,降低α-Syn的阳性表达,降低miR-137表达水平,升高MMP、PINK1和parkin表达及LC3-II/LC3-I比值,并降低p62表达,增强线粒体自噬(P<0.05);而Agomir-137能显著减弱NBP对PD大鼠线粒体自噬的促进作用(P<0.05).结论:NBP对PD大鼠的保护作用可能与降低miR-137的表达,促进线粒体自噬有关.
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