维生素D缺乏对酒精性肝损伤小鼠影响

目的 探索维生素D (VD)缺乏对酒精性肝损伤小鼠的影响及其相关作用机制.方法 40只6w龄ICR雄鼠随机分为标准组和VD缺乏组.标准组喂养标准固体饲料,VD缺乏组喂养VD缺乏固体饲料.喂养4w后再次分组,将标准组随机分成对照组(Ctrl)和酒精组(EtOH),VD缺乏组随机分成VD缺乏组(VDD)和VD缺乏+酒精组(VDD+EtOH)oCtrl组和EtOH组喂养分别喂养Liber-DeCarli对照液体饲料和Liber-DeCarli酒精液体饲料,VDD组和EtOH+VDD组分别喂养VD缺乏对照液体饲料和VD缺乏酒精液体饲料.喂养10d后,EtOH组和EtOH+VDD组小鼠一次性给予5 g/kg酒精灌胃.于给药12h后,取血清和肝组织,称量肝脏重量,计算肝脏系数;采用放射免疫法检测血清25(OH)D水平;检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平;检测肝脏甘油三酯含量(triglycerides,TG);肝脏HE染色观察组织病理学改变;反转录酶-聚合酶链锁反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测肝脏肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α )、白细胞介素-6 (interleukin-6,IL-6)、转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF p )和环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX2)及单核细胞趋化因子-1 (monocyte chemotactic protein 1,MCP-1)和角蛋白趋化因子(keratinocyte chemoattractant,KC)的mRNA 表达;Western blot 检测肝脏核因子(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65和NF-KBp50蛋白表达.结果 与EtOH相比,VDD+EtOH组小鼠肝脏指数、ALT及AST水平均明显升高;炎性因子TNF-α、IL-6、TGFβ和COX2及细胞趋化因子MCP1和KC的mRNA水平均显著上升,同时NF-κB p65和NF-κB p50蛋白表达水平均显著增加.结论 VD缺乏加重酒精性肝损伤,其作用机制可能与激活NF-κ B信号通路,促进炎症反应有关.