Toll样受体4介导Aβ25-35诱导的PC12细胞凋亡和线粒体自噬

目的 探讨沉默Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)表达对Aβ诱导的PC12细胞凋亡和线粒体自噬的影响.方法 采用Aβ25-35体外培养PC12细胞构建AD细胞模型,并采用TLR4 shRNA慢病毒感染AD细胞.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中TLR4 mRNA的表达,CCK-8法、流式细胞仪及荧光分光光度计检测抑制TLR4的表达对AD细胞的存活率、凋亡率及线粒体膜电位的影响.蛋白免疫印迹(Western blot)检测TLR4及自噬相关蛋白LC3II/I、PINK1、parkin的表达变化.结果 TLR4在AD细胞中高表达,沉默TLR4能够抑制AD细胞中TLR4的表达.与正常PC12相比,AD细胞的存活率和线粒体膜电位显著降低,而细胞凋亡率及自噬相关蛋白LC3II/I、PINK1和parkin的表达量均显著升高;沉默TLR4能够促进AD细胞的存活及线粒体膜电位的升高,抑制AD细胞的凋亡及自噬相关蛋白LC3II/I、PINK1和Parkin的表达.结论 TLR4在AD细胞中高表达,可能通过抑制AD细胞的线粒体膜电位促进细胞凋亡和线粒体自噬.