基于Ⅱ型肺泡上皮细胞RNAscope多通道荧光检测技术在类器官研究中的应用

该文探讨了RNAscope多通道荧光检测技术在类器官中的应用并建立了相应的实验体系,旨在为类器官的研究提供更多的技术与方法.该研究采用磁珠分选方法从大鼠肺组织中分选Ⅱ型肺泡上皮细胞(alveolar epithelial type Ⅱ cells,AEC2s),并采用免疫荧光鉴定AEC2s细胞的纯度,对分离的AEC2s细胞进行肺类器官培养,培养第15天时采用倒置显微镜观察肺类器官的生长规律,HE染色观察肺类器官的形态结构特征,RNAscope多通道荧光检测技术检测肺类器官原位单细胞中Sftpc、Aqp5、krt5、ki67等四个RNA的基因表达情况.结果 表明,RNAscope多通道荧光检测技术在类器官应用中具有可行性,该技术能实现类器官单细胞水平同时分析多个RNA的表达水平,在获得单细胞中拷贝RNA表达数据的同时提供完整的组织形态学信息,提高对疾病与标志物之间复杂的生物学相关性认识,因此,RNAscope多通道荧光检测技术为类器官在单细胞水平的研究开辟了新的途径.