肾小球内皮细胞Nrf2激活在ANCA相关性血管炎中的作用及其机制

目的 探讨核转录因子E2相关因子2(Nrf2)在抗中性粒细胞胞浆抗体(anti-neutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)相关性血管炎(ANCA-associated vasculitis,AAV)中的作用及调控机制.方法 采用AAV患者和健康志愿者血清刺激人条件永生化肾小球内皮细胞(conditionally immortalized human glomerular endothelial cells,ciGEnCs).分别设置空白对照组,健康对照组,AAV血清组,AAV血清组+抗氧化剂Tempol(3 mmol/L预处理).通过DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成;免疫荧光法检测Nrf2在细胞中的定位;免疫印记(Western blot)检测Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达.结果 AAV患者血清可以促进ciGEnCs的ROS增加(相比较空白对照组与健康对照组,P值均为0.0004),抗氧化剂Tempol可抑制AAV患者血清诱导的ROS生成(P=0.0180);抗氧化剂Tempol可激活抗氧化反应因子Nrf2并向核内转位,并且Nrf2蛋白表达明显增高(P=0.0143);抗氧化剂Tempol可上调Nrf2及下游HO-1、NQO1蛋白表达(P值分别为0.0298、0.0006、0.0082).结论 抗氧化治疗可能缓解AAV血管内皮损伤,有望成为延缓AAV进展的治疗策略.