枸杞多糖对2,4-二氯苯氧乙酸所致雌性大鼠生殖系统损伤的保护作用
Journal of Environmental & Occupational Medicine(2021)
摘要
[背景]2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)作为阔叶杂草除草剂和植物生长调节剂而被广泛应用,相关研究显示2,4-D具有神经毒性、内分泌干扰性、遗传毒性与致癌性以及生殖毒性等.[目的]了解2,4-D暴露对雌性大鼠生殖系统的影响,初步探讨枸杞多糖(LBP)的保护作用及可能机制.[方法]SPF级雌性SD大鼠24只,每组6只,随机分为空白对照组(去离子水1 mL·d–1)、染毒组(75 mg·kg–12,4-D)、枸杞多糖对照组(50 mg·kg–1 LBP)、枸杞多糖干预组(75 mg·kg–12,4-D+50 mg·kg–1 LBP).每天经口灌胃1次,连续染毒28d.每隔2d测量体重1次,染毒结束后取卵巢及子宫组织称重并计算脏器系数;采用苏木精-伊红染色法(HE)检测卵巢及子宫组织病理改变;采用ELISA法检测血清中雌二醇(E2)水平;使用相关试剂盒测定血清中氧化损伤[超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)及丙二醛(MDA)]水平;TUNEL荧光染色法检测卵巢及子宫组织细胞凋亡情况;Western blotting法检测卵巢组织中死亡受体通路相关蛋白Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达量.[结果]与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢组织结构异常,处于不同发育阶段的卵泡数量减少,形态出现改变,且闭锁卵泡数量增多;子宫内膜不完整,可见内膜缺失,出现不同程度的胞核假复层现象,固有层腺体数减少.与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织结构相对较完整,处于不同发育阶段的卵泡数量增加,结构相对完整,排列紧密;子宫组织结构相对较完整,内膜缺失现象及胞核假复层现象减少.各组间SOD、GSH-Px、E2水平,MDA浓度差异均有统计学意义(F=86.1、26.2、43.3、22.3,均P<0.01).与空白对照组相比,染毒组血清SOD、GSH-Px、E2水平降低(P>0.01),MDA浓度增加(P>0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组血清SOD、GSH-Px、E2水平升高(P>0.01),MDA浓度降低(P>0.01).各组间卵巢及子宫组织细胞凋亡率差异均有统计学意义(F=64.8、55.5,均P<0.01).与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率升高(P>0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢及子宫组织细胞凋亡率降低(P>0.01).各组间卵巢组织内死亡受体通路相关蛋白表达差异均有统计学意义(均P<0.05).与空白对照组相比,染毒组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达升高(P<0.05或0.01);与染毒组相比,枸杞多糖干预组大鼠卵巢组织内Fas、FasL、FADD、Pro-Caspase-8、Cleaved-Caspase-8、Pro-Caspase-3、Cleaved-Caspase-3表达降低(P<0.05或0.01).[结论]2,4-D能够引起雌性大鼠发生氧化应激进一步介导Fas-FasL通路引发细胞凋亡而造成雌性大鼠生殖系统损伤.枸杞多糖能降低雌性大鼠氧化应激水平,下调Fas-FasL通路相关蛋白表达,减少生殖细胞凋亡,以达到生殖保护的目的.
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关键词
2,4-dichlorophenoxyacetic acid,reproductive toxicity,oxidative damage,apoptosis,death receptor pathway,lycium barbarum polysaccharide
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