基于Label-free定量技术及异病同证理论的妇科实寒证患者血浆蛋白质组学研究

目的 基于Label-free定量蛋白质组学及异病同证理论探究妇科实寒证的生物学基础.方法 纳入原发性痛经实寒证患者、子宫内膜异位症实寒证患者及健康女性各8例,分别为痛经组、内异症组、正常组.采集各组月经周期第2日的血浆样本进行蛋白提取、胰酶酶解和超高效液相色谱-质谱联用分析后得到原始数据,依据筛选标准获得差异表达蛋白,并进行交集映射,获取共有的实寒证差异表达蛋白,进行生物信息学分析.结果 痛经组与正常组共筛选出219个差异表达蛋白,内异症组与正常组共筛选出180个差异表达蛋白.经交集映射得出共有的实寒证差异表达蛋白97个,其中46个蛋白上调、51个蛋白下调.对差异表达蛋白进行功能分类统计主要涉及细胞过程、对刺激的反应、代谢过程、免疫过程、生物黏附、抗氧化活性、细胞运动等.GO富集分析显示:上调蛋白主要集中在脂质转运、炎性反应、细胞迁移、细胞运动、细胞间黏附等生物学过程;下调蛋白主要集中在细胞黏附、细胞连接等生物学过程.蛋白结构域富集分析和聚类分析显示:上调蛋白主要涉及免疫球蛋白结构域;下调蛋白主要涉及亲环蛋白型肽基-脯氨酰顺反异构酶/CLD、14-3-3蛋白等结构域.KEGG通路富集分析和聚类分析结果显示:上调蛋白主要参与Th17细胞分化、谷胱甘肽代谢等通路;下调蛋白主要参与Hippo信号通路、局灶性粘连、白细胞跨内皮迁移等通路.蛋白相互作用网络中筛选出VCL、ACTR2、ACTN1等6个核心蛋白.结论 妇科实寒证发生机制主要涉及代谢、免疫调节、炎性反应、氧化损伤、内皮细胞功能受损等生物学过程和信号通路.利用蛋白质组学获得的差异表达蛋白及其涉及的信号通路对揭示妇科实寒证的生物学基础有重要意义.