氢气对慢性脑缺血大鼠脑组织铁代谢相关蛋白表达的影响

目的:探讨氢气对慢性脑缺血(CCI)大鼠脑组织铁代谢相关蛋白表达的影响。方法:健康成年雄性Wistar大鼠36只，体重300～400 g，采用随机数字表法分为3组( n＝12)：假手术组(Sham组)、CCI组、富氢盐水组(H组)。采用改良的双侧颈总动脉永久性结扎法制备大鼠CCI模型。CCI组及H组在大鼠建模4周后每天固定时点，分别腹腔注射生理盐水或富氢盐水10 ml/kg，1次/d，持续2周。CCI建模第6周时，处死大鼠，取脑组织，免疫组化法检测特异性神经元核蛋白(NeuN)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX-4)的表达，采用改良Perl染色法检测病灶脑组织铁沉积量，采用比色法测定MDA、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-px)水平，采用ELISA法检测4-羟基壬烯酸(4-HNE)水平，采用流式细胞术检测神经细胞ROS水平，采用RT-PCR法检测转铁蛋白(TF)、转铁蛋白受体1(TFR1)、铁蛋白轻链(FTL)、铁蛋白重链-1(FTH1)、二价金属离子转运体(DMT1)、铁反应元件结合蛋白2(IREB2)的mRNA表达。 结果:与Sham组比较，CCI组及H组海马CA1区NeuN、GPX-4染色阳性细胞百分比、GSH、GSH-px水平降低，铁染色阳性细胞百分比、MDA、4-HNE及神经细胞ROS水平升高，FTL mRNA、FTH1 mRNA表达下调，TF mRNA、TFR1 mRNA、DMT1 mRNA和IREB2 mRNA表达上调( P<0.05)；与CCI组比较，H组海马CA1区NeuN、GPX-4染色阳性细胞百分比、GSH和GSH-px水平升高，铁染色阳性细胞百分比、MDA、4-HNE及神经细胞ROS水平降低，FTL mRNA、FTH1 mRNA表达上调，TF mRNA、TFR1 mRNA、DMT1 mRNA和IREB2 mRNA表达下调( P<0.05)。 结论:氢气对CCI大鼠可产生神经保护作用，机制可能与其调控CCI后铁代谢及转运相关蛋白的表达，减轻神经细胞铁超载，进而抑制氧化应激有关。