hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤中的表达及对细胞增殖周期的影响研究

目的:探索环状RNA hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤中的表达及对肝母细胞瘤细胞增殖周期的影响。方法:实验细胞包括人肝母细胞瘤细胞株HepG2和HUH6，将实验细胞培养在含10%胎牛血清及1%双抗的DMEM培养基中，置于37℃、5% CO 2的恒温培养箱中。实验组织标本包括肝母细胞瘤肿瘤及癌旁组织标本，来源于中山大学孙逸仙纪念医院小儿外科住院患儿手术切除的组织。所有肿瘤组织标本和癌旁组织标本在手术切除后，均立即浸泡在RNA later保存液中防止RNA降解，随后放在-80℃冰箱保存。在肝母细胞瘤细胞株中转染hsa_circ_0005777过表达质粒，为过表达组；未转染过表达质粒的细胞株作为阴性对照，为对照组。检测内容包括：①鉴定hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤细胞株中的性质及分布情况；②检测hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤肿瘤、癌旁组织组织标本和肝母细胞瘤细胞株中的表达情况；③检测过表达组对肝母细胞瘤细胞株细胞增殖能力的影响；④检测过表达组对肝母细胞瘤细胞株细胞周期的影响及过表达组对细胞周期蛋白Cyclin D1表达水平的影响。 结果:①hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤细胞株中成环并富集在细胞质中；②hsa_circ_0005777在肝母细胞瘤组织标本中的表达显著高于癌旁组织，在肝母细胞瘤肿瘤组织标本及细胞株中明显高表达；③过表达组可明显提高肝母细胞瘤细胞株的增殖能力；④过表达组可明显促进细胞周期蛋白Cyclin D1的表达，可促进肝母细胞瘤细胞株细胞G1/S期转化。结论:hsa_circ_0005777可促进肝母细胞瘤肿瘤细胞增殖，有望成为治疗肝母细胞瘤的新靶点。