巨噬细胞表达的FBXW7对卵巢癌小鼠肿瘤生长及卵巢癌微环境影响

目的 探讨巨噬细胞表达的泛素连接酶F框/WD40域蛋白(FBXW7)对卵巢癌小鼠肿瘤生长及卵巢癌微环境的影响.方法 选择野生型(对照组)和FBXW7基因敲除(实验组)的雌性C57BL/6J小鼠为实验动物,均为6～8周龄.蛋白质印迹法和逆转录定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测2组小鼠FBXW7基因表达水平.实验组和对照组小鼠皮下均接种5×105个小鼠卵巢癌细胞株ID8,构建卵巢癌模型,每组6只.每隔4天用游标卡尺测量肿瘤长径和短径,计算肿瘤体积.流式细胞术检测并对比2组小鼠肿瘤组织中CD4+T细胞和CD8+T细胞比例.蛋白质印迹法和qRT-PCR检测2组小鼠M1和M2型巨噬细胞特异性分子蛋白及mRNA表达水平.免疫组化检测肿瘤组织中转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的分布及表达.结果 与对照组相比,实验组小鼠巨噬细胞中FBXW7蛋白和mRNA表达水平降低,差异有统计学意义,t值分别为24.418和26.728,均P<0.001.建立卵巢癌小鼠模型16 d后,实验组小鼠肿瘤体积为(341.74±163.66)mm3,大于对照组的(85.76±57.46)mm3,差异有统计学意义,t=3.615,P=0.011;实验组小鼠肿瘤组织中CD4+T细胞比例为(16.49±1.11)％,CD8+T细胞比例为(38.64±1.65)％,均高于对照组的(9.87±0.74)％和(12.26±0.90)％,差异有统计学意义(t=8.634,P=0.001;t=24.282,P<0.001).与对照组小鼠相比,实验组小鼠肿瘤坏死因子-α(TNF-α,t=8.094,P=0.001)、趋化因子配体9(CXCL9,t=11.168,P<0.001)和CXCL10(t=14.437,P<0.001)蛋白表达均降低,TNF-α(t=12.826,P<0.001)、CXCL9(t=5.654,P<0.001)和CXCL10(t=11.979,P<0.001)mRNA表达水平均降低;精氨酸酶1(Arg-1,t=20.776,P<0.001)、血管内皮生长因子(VEGF,t=18.580,P<0.001)和CC型趋化因子配体17(CCL17,t=10.962,P<0.001)蛋白表达均升高,Arg-1(t=10.958,P<0.001)、VEGF(t=13.554,P=0.001)和CCL17(t=35.358,P<0.001)mRNA表达水平均升高.与对照组相比,实验组诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达积分光密度值(t=5.754,P=0.002)降低,Arg-1(t=3.431,P=0.006)、TGF-β1(t=3.527,P=0.005)和α-SMA(t=9.708,P<0.001)积分光密度值升高.结论 FBXW7基因缺失可促进小鼠移植瘤的生长,其机制可能与调控巨噬细胞的极化及肿瘤微环境有关.