血小板反应蛋白2过表达对宫颈癌SiHa细胞增殖迁移和侵袭能力的影响

目的 探讨血小板反应蛋白2(THBS2)通过基质金属蛋白酶2(MMP2)和血管内皮生长因子(VEGF)影响宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力.方法 (1)稳转过表达的THBS2重组慢病毒至SiHa细胞,得到THBS2-LV组和相应的THBS2-NC-LV对照组.采用细胞计数盒8(CCK8)、Transwell侵袭和迁移实验等细胞功能实验检测SiHa细胞的增殖、迁移和侵袭能力;过表达THBS2后,采用蛋白质印迹法和实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测MMP2的表达情况.(2)稳转沉默MMP2慢病毒至SiHa细胞,得到MMP2-LV组和相应的MMP2-NC-LV对照组.采用蛋白质印迹法和qRT-PCR法检测下调MMP2后MMP2和VEGF的表达情况;采用细胞功能实验检验SiHa细胞增殖、侵袭和迁移的影响;采用裸鼠成瘤实验检测MMP2下调后裸鼠成瘤情况.采用2组独立样本t检验及方差分析对组间均值差异进行统计学检验.结果 (1)稳转慢病毒THBS2至SiHa细胞成功后,SiHa细胞增殖、迁移和侵袭能力下降.(2)过表达THBS2能导致MMP2蛋白的表达下调,t=-10.13,P=0.001;下调MMP2后VEGF蛋白的表达量低于对照组,t=-11.34,P＜0.001.MMP2表达水平下降使SiHa细胞增殖(P＜0.001)、迁移(P=0.025)和侵袭(P＜0.001)能力下降,MMP2-LV组细胞凋亡率高于对照组;MMP2-LV组裸鼠的肿瘤平均体积小于对照组,差异有统计学意义,t=-7.80,P＜0.001.结论 过表达THBS2使MMP2蛋白的表达下降,进而介导VEGF的表达来抑制宫颈癌SiHa细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为.