TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用

目的 研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用.方法 10μg·L-1的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原蛋白FN、CollagenⅣ表达的变化;应用Cdk5激酶活性抑制剂Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,Western blot、Real time-PCR、免疫荧光检测抑制Cdk5对TGF-β1刺激HMC后FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达的影响.结果 TGF-β1作用于HMC后,Cdk5、p35/p25蛋白及mRNA表达均呈时间依赖性增高;与正常对照组相比,转染Cdk5过表达质粒,FN、CollagenⅣ蛋白表达增加,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)增强;与TGF-β1刺激组相比,加用10μmol·L-1的Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达均减少,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)减弱,而空质粒转染组没有明显变化.结论 一定浓度的TGF-β1可诱导系膜细胞内Cdk5表达增加,抑制Cdk5可降低系膜细胞外基质沉积.