RP-HPLC测定正常人血清中的瓜氨酸

目的 采用反向HPLC法测定人血清中的瓜氨酸含量.方法 以2,4-二硝基氟苯(DNFB)为衍生化试剂,柱前衍生;采用Amethyst C18-H色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相A为乙腈-水溶液(1∶1),流动相B为50 mmol·L-1磷酸二氢钾加1‰磷酸的缓冲盐溶液,梯度洗脱,检测波长360 nm,柱温30℃,流速1 mL·min-1.结果 在该实验条件下,瓜氨酸在30 min内的分离度良好,0.25 ～ 100 μg·mL-1瓜氨酸与峰面积呈良好的线性关系,精密度的=1.98％,供试样品48 h内稳定,重复性的RSD = 1.55％,平均加样回收率为87.45％,RSD = 1.47％;在此方法基础上测定正常人血清中瓜氨酸的含量为33.08 ±6.46 μmol·L-1.结论 所用方法稳定可靠、高效简洁、灵敏度高、成本低.